کیت استخراج DNA در تهران کیت استخراج Plasmid DNA پلاسمید یک مولکول DNA

کیت استخراج Plasmid DNA
پلاسمید یک مولکول DNA دو رشته ای دایره ای و خارج کروموزومی است که در زیست شناسی مولکولی برای دستکاری و رمزگشایی اطلاعات ژنتیکی از اهمیت بالایی برخوردار است.
اصطلاح “پلاسمید” اولین بار توسط جوشوا لدربرگ در سال 1592 ابداع شد. باکتری ها می توانند پلاسمیدهای جدیدی را از سایر سلول های باکتریایی و یا از محیط دریافت کنند. آن ها همچنین می توانند به آسانی پلاسمید را از دست بدهند.
برای مثال، وقتی یک باکتری به دو قسمت تقسیم شود، ممکن است یکی از سلول های دختر دریافت پلاسمید از دست بدهد. هر پلاسمید «منشأ همانند سازی» خاص خود را دارد که باعث می شود باکتری میزبان از آن تکثیر (کپی) کند.
به همین دلیل، پلاسمیدها می توانند خود را به طور مستقل از کروموزوم باکتریایی کپی کنند، بنابراین می توان نسخه های زیادی از پلاسمید را درون یک سلول باکتریایی تکثیر کرد.
روش استخراج پلاسمید :
جداسازی DNA پلاسمید از باکتری ها یک روش مهم در زیست شناسی مولکولی است و در بسیاری از مراحل مانند کلونینگ، تعیین توالی DNA ، ترانسفکشن و ژن درمانی یک گام اساسی است. این دستکاری ها نیاز به جداسازی DNA پلاسمید با خلوص بالا دارند.
پلاسمید خالص می تواند برای استفاده فوری در کلیه مراحل زیست شناسی مولکولی استفاده شود. خالص سازی DNA پلاسمید از DNA باکتری ها با استفاده از روش لیز قلیایی که در زیست شناسی مولکولی برای جدا کردن پلاسمید DNA یا سایر اجزای سلولی مانند پروتئین ها با شکستن سلول ها به کار می رود، انجام می شود.
مراحل اساسی جداسازی پلاسمید ایجاد اختلال در ساختار سلولی برای ایجاد لیز، جداسازی پلاسمید از DNA کروموزومی، بقایای سلولی و سایر مواد نامحلول است. باکتری ها با یک محلول بافر لیز حاوی سدیم ددسیل سولفات (SDS) و هیدروکسید سدیم لیز می شوند.
در کیت استخراج پلاسمید از غشاهای میکروفیبرشیشه ای و روش لیز قلیایی استفاده می شود.
پلاسمید از سلول باکتریایی آزاد می شود و RNA با کمک آنزیم RNase از لیز سلولی حذف می گردد. زواید سلولی و رسوبات نمکی نیز با کمک سانتریفوژ در نهایت حذف می شود. در غلظت نمکی بالا، DNA پلاسمیدی به غشای میکروفیبری ستون متصل می شود.
سپس با کمک بافرهای شست و شوی مختلف، آلودگی ها و زواید سلول باکتری حذف می شود و در نهایت به وسیله آب دیونیزه یا بافر با قدرت نمکی پایین، پلاسمید از ستون میکروفیبرخارج شده و در تیوب جمع آوری می شود.
هلدینگ KTG
متشکل از سه شرکت:
کیمیا طب گستر – فروش تجهیزات کلینیکال
کیمیا تجهیز غرب – فروش تجهیزات آزمایشگاهی
کیمیا تجهیز سکو – طراحی و فضا سازی آزمایشگاهی
هلدینگ KTG با دیدگاه نوین One-stop labratory shop و با هدف ایجاد اعتماد و سیاست های بلند مدت در زمینه واردات و تولید و توزیع کالاهای شیمیائی آزمایشگاهی از قبیل تجهیزات آزمایشگاهی، مواد آزمایشگاهی، لوازم مصرفی، ابزار سنجش، ظروف شیشه ای و پلاستیکی آزمایشگاهی، تجهیزات ایمنی در آزمایشگاه و طراحی و فضا سازی آزمایشگاه های کشور از سال 1375 سرمایه گذاری شده است